在食品营养成分中,矿物质、有机酸、维生素、氨基酸、蛋白质、糖类等成分,都可使用高效液相色谱法检测。其中,糖类是食品中最重要的营养成分之一,在高效液相色谱法检测分析中,可使用蒸发光散射检测器、示差折光检测器进行检测。例如,使用示差折光检测器,选择InertsilNH2色谱柱,流动相使用80:20比例的乙腈和水,可以对乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、果糖等主要糖类同时检测,能够达到较好的重现性,且检测快速、准确、简单,在生产企业食品质量控制中比较适用。采用柱后衍生法检测食品中的氨基酸,具有反应重现性好、衍生物稳定的特点,但是检测灵敏度较低、反应时间较长。采用柱前衍生法检测,则具有操作简单、灵敏度高、试剂种类多、衍生时间短的特点,但是衍生物水解、衍生副产物等都会产生影响。因此,利用高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法、高效液相色谱-蒸发光散射检测法,能够达到更好的效果。例如,利用该发表论文方法对18种游离氨基酸进行检测,可达到0.07-5.00ug/L的检出限,71.2%-120.9%的回收率。对20种未衍生氨基酸使用蒸发光散射检测器检测,当峰面积对数值、质量浓度对数值达到30-300mg/L时,能达到较好的线性关系,可达到24-100mg的检出限和90.6%-106%的回收率。这些方法无需衍生物处理,能够直接检测,同时保证了较高的灵敏度,操作也比较简单,可应用于同时检测多种氨基酸。此外,在很多保健食品活性成分的分析中,也可应用高效液相色谱法。如使用高效液相色谱法梯度洗脱法,使用KromasilC18色谱柱,流动相选取0.1%磷酸、乙腈,可对西洋参中的多种皂苷成分进行分析。
二、不应添加成分发表论文分析
在很多食品尤其是保健食品中,往往会出现一些不应添加的成分,可使用高效液相色谱法进行分析。由于保健品市场快速发展,市场规模较大,因此有些不法商贩为了利益,在保健品中非法添加化学药品成分,可能对消费者的身体健康安全造成影响。因此需要采取有效方法进行分析,加强食品安全监管力度。例如,在调节血脂类保健食品中,采用高效液相色谱法能够对吉非罗齐、氟伐他汀钠、苯扎贝特、阿托伐他汀钙、辛伐他汀、普伐他汀钠、瑞舒伐他汀钙、洛伐他汀、烟酸等不应添加的药物成分进行检测。使用甲醇提取样品,分析柱采用InertsilODS-3,流动相使用0.02mol/L乙酸铵和甲醇,采取梯度洗脱,检测波长为230nm,能够在短时间内对以上各种化学药物成分定量分析,达到较高的精密度、准确度。采用高效液相色谱法还可检测出改善记忆类保健食品中的双氯芬酸钠、尼莫地平、已烯雌酚、氟桂利嗪、茴拉西坦加兰他敏、烟酸占替诺、倍他司汀、多奈哌齐、雌三醇、阿米三嗪、萘普生、石杉碱甲、氟马西尼、依达拉奉、咖啡因、吡拉西坦等不应添加的药物成分。番泻叶能够发挥减肥、抗菌、排毒养颜的效果,其中主要的药理活性成分是番泻苷A、番泻苷B。不过番泻叶具有猛烈的药性,应当严格控制使用人群及用量,一旦服用量过度,将会影响胃肠系统健康。因此,对于保健食品中的番泻苷A、番泻苷B等成分,可以使用高效液相色谱法进行定量分析。使用甲醇提取样品,分析柱选用BEH-C18,流动相使用0.1%甲酸和乙腈,采取梯度洗脱,可在很短的时间内完全分离两种物质,在检测范围内,能得到较好的线性关系,可以快速检测出减肥类保健食品中不应添加的番泻苷A、番泻苷B,保证保健类食品安全。
三、食品添加剂检测分析在很多食品当中,都会添加香精香料、色素、抗氧化剂、防腐剂、甜味剂等食品添加剂。天然的食品添加剂,不会对人体造成较大危害,但是很多化学合成食品添加剂,对人体则可能产生毒性作用,所以必须对其使用严格控制。因此,在食品分析中,需要对食品添加剂的成分、含量进行检测,进而保证食品安全。在具体应用中,一般使用紫外-可见光检测器或示差折光检测器、电导检测器等进行检测。对于食品中的阿斯巴甜、糖精钠、安赛蜜、甜蜜素等甜味剂成分,都可利用高效液相色谱法检测。发表论文例如,使用高效液相色谱-质谱串联分析法,能够对白酒中的三氯蔗糖、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、糖精钠等甜味剂成分进行检测。使用微孔滤膜过滤样品,分析柱选用ZORB-AXEclipsePlusC18,流动相选用0.1%甲酸和乙腈,能够达到较高的精密度,同时检测速度快、处理方法简单。采用高效液相色谱法,可以直接检测羟基苯甲酸乙酯、脱氢醋酸、对羟基苯甲酸甲酯、苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸等防腐剂,以及糖精钠、安赛蜜等甜味剂进行检测,分析柱选取phenomenexGeminiC18,流动相选用乙酸铵、甲醇,采取梯度洗脱,检测波长为254nm和130nm。可以完全分离以上几种食品添加剂,在0.3-1.0mg范围内,具有较好的线性系数,能达到85.25%-98.26%的回收率,在香肠制品、肉类制品的防腐剂及甜味剂检测中比较常用。使用固相萃取-高效液相色谱法,可以对食品中的柠檬黄、苋菜红、赤藓红、胭脂红、日落黄、诱惑红、酸性红、亮蓝等色素进行检测,也能够达到理想对的线性关系和回收率,检测时间较短,检测准确度较高。
四、农兽药残留检测分析
当前很多食品中都有农药残留,对人体健康有很大的危害。以往主要使用气相色谱法检测,但是无法检测如敌克松、氨基甲酸酯、溴氰菊酯等在碱性条件易分解、热稳定性差、容易失活的成分。而高效液相色谱法能够克服这一困难,对食品农药残留做出有效检测。例如,对罗汉果中的多种氨基甲酸酯农药残留量分析,可采用高效液相色谱-质谱连用分析法,利用超声提取样品,浓缩后经过固相萃取小柱,分析柱选用VP-ODS,使用0.2甲酸、水梯度洗脱,在0.1-2.0ug范围内,能达到较好的线性关系,可达到84.5%-111.7%的回收率。该方法快速、准确,具有较强的抗干扰能力,能够用于检测多种氨基酸甲酯类的农药残留。采用高效液相色谱-串联质谱法,可以用于快速发表论文分析大批量食品的多种农药残留。例如该法可以对饮用水中的丁草胺、甲草胺、毒死蜱、莠去津、多菌灵、甲基对硫磷、乙草胺、敌敌畏、呋喃丹、2,4-滴、灭草松、乐果等农药残留成分进行检测,并得到准确结果。。在兽药残留分析中,高效液相色谱法也能发挥重要的作用,抗寄生虫类、杀虫剂、生长促进剂、抗生素类、合成抗菌素类等都是毒理较大的残留兽药,其中动物性食品中最常见的兽药残留就是抗生素、抗菌素等物质。在动物饲料添加和疾病治疗中,经常使用链霉素,容易造成残留。可使用高效液相色谱法进行分析检测。链霉素具有与独特的极性和离子特征,因此反相色谱柱不容易分离,可以将适量酸或缓冲液加入流动相,可以下调极性,使其在C18柱上分配性能得到改善。应用高效液相色谱法检测鸡组织中残留的链霉素,分析柱选用C18柱,流动相使用10:10:80的比例的乙腈、3.3pH醋酸缓冲液、水,能够达到完好的分离效果。对鳗鱼组织中的大环内脂、喹诺酮等兽药残留,可使用超高液相色谱-质谱分析法,能够取得良好的效果。
五、食品有害成分检测分析在发酵食品中,存在较多的生物胺成分,主要是氨基酸脱羧或醛、酮类物质,受到氨基酸转氨酶的作用,产生胺类物质。此类物质在奶酪、啤酒、水产品、肉制品、罐头等氨基酸、蛋白质较多的食品中都容易存在。低浓度的胺类物质能够发挥生理活性,但如果超过浓度上限就会发生毒性作用。例如,部分生物胺可以可亚硝酸盐形成亚硝胺,在食品中含量过高,就会造成食物变质、腐败。因此可利用该项指标对食品毒理学风险进行评估。尸胺、章胺、苯乙胺、亚精胺、精胺、组胺、酪胺、腐胺、色胺等,都属于常见生物胺的类型。以往在生物胺的检测中,使用生物传感器法、免疫分析法,能够保证检测限精确,不过这些方法尚未发展成熟,操作复杂程度较高,有一定的局限性,因此只能对样品中一种或具有相似化学结构的生物胺进行检测,无法同时测定多种组分。而高效液相色谱法在应用中能够发挥出更好的效果,可以将该技术与其他相关技术综合利用,例如将高效液相色谱法和分子印迹聚合物固相萃取技术相结合,在食品生物胺成分检测中效果比较显著。很多食品中还存在重金属的有害成分,对人体健康有很大影响。对此,高效液相色谱法也能发挥较好的检测作用。例如,有发表论文研究中使用5-二乙氨基酚、2-2-噻唑偶氮作为柱前衍生剂,分析柱选择了WatersNova-Pak-18,流动相使用磷酸-磷酸钠缓冲液、0.30%磷酸甲醇溶液,实行梯度洗脱。然后对食品中的锰、锌、铜、镍、钴、铁等成分利用紫外二极管矩阵检测器检测,能够达到较高的灵敏度和回收率,应用效果比较理想,可靠性和准确性较高。
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